湖南省畜牧兽医研究所动物营养研究室

摘要：选择1d AA肉鸡1200羽，随机分为4个处理，每处理设6个重复，每个重复50羽鸡。试验设对照组和3个试验组，对照组饲喂基础日粮，试验组分别饲喂基础日粮添加100mg/kg、150mg/kg和200mg/kg诺美康，目的是研究日粮添加诺美康对肉鸡生产性能的影响及相关机理。结果表明：肉鸡日粮添加诺美康①明显提高了各阶段增重（P<0.05），并降低了料重比（P<0.05）和死亡率。②显著提高了血液中SOD、GSH-Px和IgM的含量（P<0.05），并明显降低了MDA含量（P<0.05），改善了机体抗氧化能力。③明显提高了日粮CP、EE的表观消化率和能量表观代谢率（P<0.05），增加了日粮中可利用养分浓度和有效能含量；④显著增加了肠道乳酸杆菌和双歧杆菌数量，抑制了肠道大肠杆菌的生长（P<0.05），改善了肠道健康。表明诺美康对提高AA肉鸡生长和改善健康具有较好的效果。

关键词：诺美康；生产性能；作用机理；AA肉鸡

葡萄糖氧化酶（Glucose oxidase，GOD）是一种需氧脱氢酶，在有氧情况下，能催化β-D-葡萄糖生成葡萄糖酸和过氧化氢。作为一种新型饲料酶制剂，它不但具有抗氧化效果，还能调节畜禽肠道微生物区系，改善胃肠道环境，具有控制畜禽腹泻，提高饲料转化率，促进生长等作用。近年来，随着抗生素禁用呼声日益高涨，人们对抗生素替代品的需求不断增加，葡萄糖氧化酶以其独特作用效果备受关注。但受饲料化应用成本高及在饲料加工过程中稳定性差等因素影响，葡萄糖氧化酶在饲料工业中普遍推广还有待于生产技术水平的提高和稳定性保护技术的突破。湖南诺维信生物技术公司是一家高科技企业，多年来致力于生物酶制剂的修饰及稳定性保护技术研究，通过反复试验已成功研制出了葡萄糖氧化酶在饲料加工中的稳定保护及增效技术，于2015年10月成功推出畜禽饲料用稳定强效型葡萄糖氧化酶产品—诺美康，并先后在仔猪、肉鸭等方面进行了饲喂试验，取得了明显效果。为进一步探明诺美康对肉鸡生产性能的影响及其相关机理，本试验以AA肉鸡作为试验动物，目的是研究诺美康添加水平对肉鸡生产性能、养分消化率、血液生化指标以及后肠道菌群的影响，为诺美康产品在肉鸡饲料生产中推广和应用提供理论依据。

1  试验设计

1.1  试验动物及分组

选择1200羽1日龄健康AA肉鸡（公母各半）随机分为4个处理，每处理设6个重复，每个重复50羽。试验为期42天，分前后两期。其中对照组饲喂基础日粮；试验组分别在对照日粮基础上每吨添加100g、150g和200g稳定强效型葡萄糖氧化酶—诺美康。试验用诺美康产品由湖南诺维信生物技术有限公司提供，每克含葡萄糖氧化酶25000 U。

1.2 日粮组成及营养水平

试验基础日粮参照NRC（1994）肉鸡营养需要以玉米-豆粕为基础配制，配方及营养水平见表1。饲料制成颗粒饲喂，由湖南省畜牧兽医研究所试验工厂生产。

表1试验基础饲粮组成和营养水平（风干基础，%）

注：^1）预混料可为每千克全价日粮提供：VA12000 IU；VD₃ 2500 IU；VE 20 mg；VK₃ 3 mg；VB₁ 3 mg；VB₂ 8 mg；VB₆ 7 mg；VB₁₂ 0.03 mg；D-泛酸D-Pantothenic acid 20 mg；烟酸 niacin 50 mg；生物素biotin 0.1 mg；叶酸 folic acid 1.5 mg；Cu 10 mg，Zn 100 mg，Fe 80 mg，Mn 90 mg，I 0.5 mg，Se 0.3 mg。

   ²⁾ 营养水平为计算值。

1.3  饲养管理

试验于2015年12月5日至2016年1月15日在湖南省畜牧兽医研究所试验鸡场进行。试鸡采用网上平养，人工持续光照，育雏时采用红外灯供暖，保持正常温度（第1周33～34℃，第2周27～31℃），其后视具体气温情况供暖；鸡舍自然通风，相对湿度保持在55～65%；自由饮水和采食，按常规免疫。

1.4  测定指标与方法

1.4.1  生产性能

试验期间每天记录鸡只死亡情况，按重复记录饲料消耗量，分别于1、21和42日龄早晨8:00称试验鸡空腹重（提前12小时停饲），称各重复剩余料重，并计算各处理各阶段死亡率、平均耗料量、平均日增重和料肉比。

1.4.2  血液指标

于42日龄时从每处理随机抽取6只鸡（每重复1只），翼静脉采血8mL左右，集入10mL离心管倾斜放置，让血液自然凝固。在血凝0.5小时后以3000 r/m离心15分钟分离血清，收集离心管上层血清，于-20℃下保存，以测定各项生化指标。其中，血清三碘甲腺原氨酸（T₃）、甲状腺素（T₄）、生长激素（GH）、IgΑ和IgM均采用放射免疫法（RIΑ）测定；超氧化物气化酶（SOD）采用抽提法测定；丙二醛（MDA）采用硫代巴比妥酸法测定；谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）采用非酶促反应法测定。测定仪器主要有CX4Pro全自动生化分析仪（Beckman Coulte公司生产）和Analytikjena Specord分光光度计。

1.4.3后肠道菌群

在进行步骤1.4.2的同时，于回肠和盲肠入口处用消毒棉线扎紧，然后将扎口的盲肠取出，放入已灭菌的样品袋，并立即带回实验室作菌群测定。

具体测定方法如下：在超净工作台无菌取样1g左右，加入到装有9mL稀释液的无菌试管中，并放置5～8粒小玻璃珠振荡30s，待食糜混匀后，再进行逐级10倍稀释，直到稀释度达到10^-8。在10^-2～10^-8的每个稀释度，分别吸取0.1mL稀释液接种于：麦康凯（Maconkey Αgar）平板培养基中进行大肠杆菌培养和计数，Rogosa SL平皿培养基中进行乳酸杆菌培养和计数，BS平皿培养基进行双歧杆菌培养和计数。接种时，每种菌的每个稀释度均做3个平行样。接种后分别置于35℃、35℃和37℃恒温培养箱中倒置培养24小时、48小时和48小时后进行菌落计数（乳酸杆菌和双歧杆菌为厌氧培养）。通常以含50～150个菌落的稀释度平皿用作计数，结果以细菌的Log10值（Log10 CFG/g肠道内容物）表示。

1.4.4  养分消化率

生长试验结束前2周分别从各处理中选择接近平均体重、采食正常、无怪癖的健康公鸡6只进行单笼代谢试验测定诺美康添加对饲料蛋白质、能量等的利用效率。试鸡于排泄腔口外围处缝合1个无底瓶盖，用于连接塑料瓶收集粪、尿。手术后试鸡恢复5天，并作为预饲期。正饲期4天，前2天为禁食排空期，禁食期间通过饮水每鸡每日补充葡萄糖50g，于第3天强饲2次（上午8:00和下午5:00），每次准确强饲40～50g饲料并及时按个体记录时间,强饲后分别收集每只鸡48小时的粪便，每日收集若干次，每次收集后加0.1mol/L HCL搅拌均匀，并立即保存于4℃下；或直接在60～65℃烘箱干燥至恒重，置室内回潮24小时，称重、记录，作为风干粪重；粉碎、过40目筛；再将排泄物混合均匀，装瓶封存并立即取样，在100～105℃下测定其绝干粪重。饲料和粪样中粗蛋白质用凯氏定氮法测定；能量用全自动氧弹测热仪（长沙开元仪器股份有限公司）测定；粗脂肪用索氏提取法测定。养分消化率计算公式如下：